Manuel de diagnostic de l'OMSA (Terrestrial Manual, chap. 1.1.6) désigne les six missions de laboratoire les plus fréquentes:
L'échantillon doit être adapté à la destination, au type d'animal et au type d'échantillon. Il en va de même pour les méthodes de laboratoire et les express chez l'animal.
Des objectifs différents exigent des propriétés différentes du test. Le dépistage est appliqué à un corps sain, donc on attend de lui qu'il ait une grande sensibilité diagnostique: passer à côté d'un animal infecté. Le test de confirmation permet de réduire le nombre de faux résultats positifs. D'où le schéma courant: un dépistage sensible, puis une confirmation spécifique. L'évaluation de l'immunité post-occinal est particulièrement dangereuse: l'animal sera considéré comme protégé, bien qu'il n'ait pas d'immunité.
Le PCR détecte une partie du génome de l'agent. C'est une méthode directe: il répond à la question de savoir si l'échantillon contient du matériel génétique. C'est une enquête importante. Le PCR trouve une séquence de micro-organismes vivants et morts tant que l'acide nucléique est présent dans l'échantillon. Il faut un agent vivant pour pousser.
Avant de réagir, l'acide nucléique est séparé du matériau clinique. L'OMSA recommande de choisir la méthode d'extraction à l'avance: une extraction automatique peut s'avérer nécessaire en cas de flux importants d'échantillons.
La grande sensibilité analytique de l'application crée également un risque. Le transfert des ampoules de l'échantillon à l'échantillon donne de faux résultats positifs. L'OMSA recommande de séparer les différentes phases des locaux ou des boxes, de changer les blouses et les gants, et d'organiser des programmes de nettoyage.
Le résultat est lu avec les contrôles:
Les inhibiteurs sont plus fréquents dans les fécales et le sperme, le sang étant moins élevé. Les échantillons cloaciques contiennent plus souvent que les échantillons de la bouche.
L'ELISA détecte des anticorps ou des antigènes dans le sérum, le plasma sanguin et d'autres échantillons. La méthode est utilisée pour la surveillance sérologique du nombre de personnes, le dépistage et l'évaluation de l'immunité après la vaccination.
Les formats diffèrent en fonction de ce qui est mordu sur la tablette et de ce qu'ils capturent:
| Format | Comment fonctionne - t - il? | Où est le plus pratique |
|---|---|---|
| Indirect | Les échantillons d'anticorps associés sont détectés avec un conjonctif antiespèces. | скрининг больших количеств проб; один набор рассчитан на один или несколько видов животных |
| Concurrence (bloquant) | Les anticorps sont en concurrence avec l'anticorps sur la tablette. | Espèces pour lesquelles il n'existe pas d'antitypes; Le sérum est utilisé dans de mauvaises conditions d'élevage, moins d'interférences avec une fixation non spécifique. |
| Sandwich | L'antigène retient un piège anticorps morbide. | D'importants antigènes et protéines complexes; Limitation du format de l'antigène à au moins deux zones antigéniques |
L'ELISA pour l'antigène et les PCR s'efforcent d'ensemble de trouver l'agent lui-même. Les tests d'antigène et d'agent antigène sont généralement plus visibles que les tests d'anticorps: la réponse immunitaire est plus longue que l'agent d'analyse lui-même.
Réaction de l'immunodiffusion dans le gel agarique (AGID). Le sérum et l'antigène sont introduits dans les trous voisins du gel. La réunion crée une ligne de guérison, qui est lue à l'œil. L'équipement est simple, c'est peu coûteux.
Le RED fait partie des méthodes moins courantes de détection des anticorps. Pour le leucémie, la direction décrit le RED comme un test spécifique, mais non très sensible, pour le sérum d'animaux individuels. Il n'est pas approprié pour le lait, sauf pour le premier marteau.
Conclusion pratique: le RED confirme et trouve plus faible. Lorsque la sérologie du troupeau nécessite une sensibilité, elle est complétée par un ELISA ou un PCR.
L'analyse immunochromatographique (IHA) est effectuée sur la base d'un test ou dans une cassette. L'ERP appelle ces dispositifs point of care, ou pen-side tests, et les place dans les nouvelles méthodes de détection des anticorps.
Les conditions d'emploi de la WCW sont clairement décrites. Les tests express sont appliqués dans des conditions ambiantes différentes, sur différents types d'échantillons prélevés dans des conditions non stérilisées, par des opérateurs ayant une formation différente. C'est pourquoi le test exige une résistance aux fluctuations de température, d'humidité et d'éclairement et à la qualification de l'opérateur. L'OMSA indique que la nécessité d'une étude de validation et d'un rapport sur les résultats positifs d'un laboratoire agréé pour l'étude des maladies exotiques, en particulier, doit être prise en compte dans les règlements et les manuels d'essai en vigueur.
D'où le rôle de l'IHA: sélectionner rapidement les animaux pour une étude plus poussée, obtenir une évaluation préliminaire là où le laboratoire est loin. Le diagnostic est établi à l'issue d'une analyse en laboratoire selon une procédure qui définit les règles vétérinaires.
Les méthodes classiques restent dans les règles lorsqu'il faut un agent vivant ou une réaction de l'immunité cellulaire.
L'étude des branches de la Russie comprend une bactérie, une méthode culturelle avec séparation de la culture pure de l'agent et un échantillon biologique. La culture a besoin d'un agent vivant, qui est différent du PCR. Selon le Règlement no 534, les PCR sont utilisés comme test rapide pour la tuberculose, mais les résultats sont nécessairement confirmés par des études bactériologiques (p. 25).
L'échantillon allergique est différent: le médicament pour diagnostiquer la tuberculose injecte l'animal et tient compte de sa réaction. Des études d'allergie de planification sont effectuées pour prouver qu'il n'y a pas de circulation de l'agent tuberculose dans la ferme (p. 8 Règlement no 534.
L'étude histologique cherche des modifications dans les tissus. Dans le Règlement no 156, le diagnostic de la leucémie est considéré comme ayant été établi lorsque de tels changements ont été détectés lors d'une étude histologique (p. 21).
Le chapitre 1.1.2 du manuel de l'OMSA commence par une simple affirmation: l'étude dépend de la qualité et de l'aptitude des échantillons. Quatre pertes fréquentes:
Le sérum est préparé à partir du sang sans anticoagulateur, et le caillot peut être réduit à la température ambiante pour protéger l'échantillon contre la chaleur et le froid. Les échantillons de fécales sont conservés dans un réfrigérateur à 4 °C ou sur la glace et font l'objet d'une étude aussi rapide que possible.
Des anticorps géants chez un jeune. Le veau reçoit des anticorps avec un molos. Pour ce qui est de la leucémie de la CMS, la direction de l'OMSA indique que les anticorps maternels peuvent disparaître jusqu'à 6 ou 7 mois et que la sérologie ne permet pas de les distinguer des anticorps d'une infection active. L'infection active confirme le PCR sur le virus. Les veaux à anticorps violets sont cités dans le manuel dans les cas où les PCR sont utiles pour un animal isolé. Le Règlement no 156 a fait de cette règle une norme: les animaux sont étudiés de 15 jours civils à 6 mois inclus par la méthode moléculaire et biologique.
La fenêtre avant la séroconversion. La fenêtre de diagnostic est l'intervalle entre le contact avec l'agent et le moment où les anticorps sont détectés. Pour le virus de la leucémie du CRS, les responsables de l'U.S.W. donnent 3 à 16 semaines. Une sérologie négative chez un animal récemment infecté est attendue et la maladie n'est pas exclue. Le leucocèse s'accompagne d'une longue période d'incubation: les règles s'appellent 2 mois à 6 ans.
Un cas isolé de période périnatale. Les anticorps sortent du sang d'une vache dans un marteau, et le RID ne les voit peut-être pas. La direction de la WRA ne considère pas le résultat final du RED comme négatif 2 à 6 semaines avant l'hôtel et 1 à 2 semaines après; L'étude est répétée. Le Règlement No 156 fixe la durée de la sélection: le sang par sérologie est prélevé au plus tôt 14 jours civils après l'auteur et au plus tard 14 jours avant l'arrivée.
Des anticorps de vaccin. La sérologie montre un contact avec l'antigène, et sa source est un vaccin. Le Règlement no 703 exige que la date de la dernière vaccination, le numéro de série, le nom et le fabricant du vaccin soient indiqués dans la lettre d'accompagnement (p. 23). Ces données sont enregistrées si le propriétaire de l'animal ou un vétérinaire les a fournies. Quand il n'y a pas eu de vaccin, la lettre en fait mention. Le Règlement no 156 n'autorise pas le prélèvement de sang sur la sérologie plus de 14 jours après l'introduction de vaccins vivants ou d'allergènes (P. 18). Si les données sur la vaccination ne parviennent pas au laboratoire, le résultat est mal lu.
| Méthode | Ce que le test détecte | Échantillon | Quand ils sont utilisés |
|---|---|---|---|
| PCR en temps réel | ADN ou ARN de l'agent, y compris le défunt | Les instructions de recrutement; pour l'injection de sang et de nourriture entiers sur le virus de la leucémie | La confirmation du cas; Un jeune homme avec des anticorps cools; Période allant jusqu'à la séroconversion |
| ELISA contre anticorps | Des anticorps à l'extrémateur | Sérum ou plasma, dans la partie des jeux censurés | Surveillance du nombre de personnes, dépistage, évaluation de l'immunité après la vaccination |
| ELISA antigène | antigène de l'agent injecteur | d'instructions pour le recrutement | La période d'émission de l'agent; La fenêtre est plus longue que la sérologie. |
| IDG | Anticorps précipitatifs | sérum ou plasma | Sérologie là où la méthode est fixée par les règles; confirmation |
| ISA (test rapide) | anticorps ou antigène | de l'instruction de test | Évaluation préliminaire dans le champ; Les résultats positifs sont confirmés en laboratoire. |
| Recherche bactérienne | d'un agent vivant | Pâte, lait, secrets. | diagnostique de la tuberculose et de la brucellose |
| Échantillon allergique | Réaction de l'animal au médicament injecté | Le médicament est injecté à un animal. | плановые исследования на туберкулёз (п. 8 Правил № 534) |
| Étude hématologique | Changement de l'image du sang | Sang avec une solution EDTA de 10% | лейкоз КРС: у животных старше 6 месяцев после положительной серологии (п. 18 Правил № 156) |
Les règles vétérinaires russes parlent souvent de méthode directe. Trois exemples.
Leycos du CDC. Правила, утверждённые приказом Минсельхоза России от 24.03.2021 № 156, действуют с 1 сентября 2021 года до 1 сентября 2027 года. Серологические исследования проводят методами ИФА и (или) РИД, молекулярно-биологические – методом ПЦР (п. 20). Метод привязан к возрасту (п. 18). От животных старше 6 месяцев берут 5–7 мл крови без антикоагулянта или с фактором свёртывания – на серологию. От животных от 15 календарных дней до 6 месяцев включительно берут 5–7 мл крови с антикоагулянтом – на молекулярно-биологическое исследование.
Плановую серологию у животных старше 6 месяцев проводят раз в год. На быков-производителей (доноров), коров-доноров эмбрионов и животных-продуцентов это правило не распространяется: животных-продуцентов проверяют 2 раза в год, быков-производителей, используемых в случке, – 3 раза в год (п. 9). Подпункт «а» пункта 9, пункты 18, 19 и 21 действуют в редакции приказа Минсельхоза России от 08.04.2025 № 229 – с 1 сентября 2025 года. Разбор по группам животных – в статье Leycos du CDC: RED, ELISA ou PCR.
Brucellose. Правила, утверждённые приказом Минсельхоза России от 22.11.2024 № 703, en vigueur du 1er mars 2025 au 1er mars 2031. Les recherches sont effectuées par des méthodes bactériologiques, des PCR et des méthodes sérologiques du tableau no 2 du paragraphe 13 du Règlement (p. 24). Si les résultats de la sérologie sont douteux, le sang est récidivé 25 à 45 jours civils à compter du jour de la première sélection (p. 22). Les échantillons doivent être livrés au laboratoire dans les 48 heures suivant la sélection (p. 23).
Tuberculose. Règlement approuvé par l'ordonnance ministérielle no 534 du 8 septembre 2020, действуют с 1 марта 2021 года до 1 марта 2027 года. Для доказательства отсутствия циркуляции возбудителя проводят плановые аллергические исследования (п. 8 в редакции приказа Минсельхоза России от 02.11.2022 № 777, действует с 1 марта 2023 года). Методы лабораторного исследования – бактериологические, включая бактериоскопический, культуральный и биологическую пробу, а также ПЦР (п. 25). ПЦР применяют для идентификации возбудителя при бактериологическом исследовании и как экспресс-тест с обязательным подтверждением бактериологическими исследованиями. Отрицательный результат ПЦР окончательным не считают. Пробы доставляют в лабораторию в течение 72 часов с момента отбора (п. 24).
Il est facile de voir la différence entre les méthodes pour une même maladie. Pour la leucémie, il y a dans le catalogue des ensembles de trois méthodes appelées Règlement No 156:
Les sections du catalogue sont organisées selon la méthode. Dans la section PCR Plus de 130 ensembles de production propre, dont plus de 100 pour la détection des agents pathogènes chez les animaux, les oiseaux, les poissons et les abeilles. La plupart des réactions sont de 55 et 110. Dans la section ELISA Plus de 110 ensembles d'ID.vet pour le diagnostic sérologique et les sérums de contrôle ID.vet. Séparés Test semi-plastique de l'ISA et dossier complet.
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Le PCR cherche du matériel génétique de l'agent, de l'AFA ou de son antigène. Le CCR répond à une question de l'agent d'exécution ici, la sérologie de l'organisme qui l'a rencontré. La sérologie ne distingue pas l'infection de la vaccination, et le PCR détecte l'acide nucléique et les micro-organismes morts.
C'est une cause fréquente d'anticorps. D'après l'OMSA, les anticorps maternels du virus de la leucémie peuvent durer jusqu'à 6 ou 7 mois sans être infectés. En conséquence, le Règlement no 156 prescrit une étude moléculaire et biologique pour les animaux de 15 jours civils à 6 mois inclus.
Non. L'OMSA indique que la nécessité d'une étude de validation et d'un rapport sur les résultats positifs d'un laboratoire accrédité doit être prise en compte, en particulier dans le cadre de l'étude des maladies exotiques. Les diagnostics sont établis sur la base des résultats des analyses de laboratoire, selon les modalités fixées par le règlement vétérinaire pour une maladie donnée.
Le Règlement no 703 prévoit un nouveau prélèvement d'échantillons sanguins dans un délai de 25 à 45 jours civils à compter du jour de la première échantillonnage (p. 22). C'est au service public qu'il appartient de décider de la suite à donner.
Pour distinguer les anticorps post-infectieux des anticorps après la contamination. Le Règlement no 703 exige que la date de la dernière vaccination, le numéro de série, le nom et le fabricant du vaccin soient indiqués dans la lettre d'accompagnement (p. 23). Ces données doivent être fournies par le propriétaire de l'animal ou par un vétérinaire. L'absence de vaccination est également notée. Le Règlement no 156 fixe également le délai de sélection: 14 jours civils au plus tard après l'introduction de vaccins vivants ou d'allergènes (p. 18).
Ce document est fourni à titre informatif et ne remplace ni les règles vétérinaires ni l’avis d’un professionnel vétérinaire. Le diagnostic est établi à partir des résultats des analyses de laboratoire, selon la procédure prévue par la législation.
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