La leucose bovine est causée par le virus de la leucose bovine (bovine leukaemia virus, BLV), un virus oncogène à ARN du genre Deltaretrovirus, de la famille Retroviridae. Son génome s’intègre sous forme d’ADN proviral dans l’ADN des cellules infectées, principalement les lymphocytes B. L’infection persiste toute la vie, de même que les anticorps dirigés contre le virus. Il n’existe ni vaccin ni traitement contre la leucose bovine.
Les règles distinguent trois stades de la maladie : asymptomatique, hématologique et clinique. Les deux premiers ne présentent pas de signes cliniques caractéristiques. Au stade asymptomatique, le sérum contient des anticorps dirigés contre le virus ; au stade hématologique, le nombre de lymphocytes sanguins reste élevé. Selon les règles, la période d’incubation dure de 2 mois à 6 ans.
Selon les directives de l'Organisation mondiale de la santé animale (OMSA, WOAH), la plupart des infections sont subcliniques. Une lymphocytose stable se développe chez 30 à 70% des animaux infectés, et des tumeurs se produisent chez 0,1 à 10%, généralement chez les plus de 3 ans. C'est pour ça que les animaux infectés dans le troupeau sont détectés en laboratoire.
Le BLV n’est pas la seule cause de tumeurs chez les bovins. Le manuel de l’OMSA distingue la leucose bovine sporadique, qui comprend les lymphomes des veaux ainsi que les formes cutanée et thymique, dont la cause est inconnue. L’OMSA réserve le terme « leucose bovine enzootique » aux lymphomes causés par le BLV. La PCR aide à les différencier dans les tissus tumoraux ; l’OMSA la considère utile pour examiner les tumeurs, y compris celles prélevées à l’abattoir.
Les modalités de dépistage sont définies par les Règles vétérinaires relatives à la leucose bovine, approuvées par l’arrêté n° 156 du ministère russe de l’Agriculture du 24.03.2021. Elles restent en vigueur jusqu’au 1 septembre 2027. Depuis le 1 septembre 2025, les règles s’appliquent dans leur version modifiée par l’arrêté n° 229 du ministère russe de l’Agriculture du 08.04.2025.
Les méthodes d’analyse (paragraphe 20) et les délais de prélèvement sanguin par rapport à la vaccination et au vêlage (paragraphe 18) restent inchangés. Les intervalles entre les analyses, les conditions d’introduction des animaux et la procédure de diagnostic sérologique ont changé. Les principaux points pour les laboratoires sont les suivants :
Le paragraphe 18 relie l’âge et le statut de l’animal à la méthode, à l’échantillon et au tube de prélèvement :
| Groupe | Méthode | Échantillon selon le paragraphe 18 |
|---|---|---|
| Veaux âgés de 15 jours à 6 mois inclus | PCR | 5–7 ml de sang avec anticoagulant : solution d’EDTA à 3 % dans un rapport 10:1, ou citrate de sodium |
| Animaux de plus de 6 mois | Immunodiffusion en gélose et/ou ELISA | 5–7 ml de sang sans anticoagulant ou avec un activateur de coagulation |
| Animaux de plus de 6 mois présentant une sérologie positive | hématologie | 5–7 ml de sang avec une solution d’EDTA à 10 %, à raison de 0,02 ml pour 1 ml de sang |
| Animaux morts | histologie (paragraphe 21) | Fragments d’organes de 2×2×1 cm dans du formol à 10 %, dans un rapport 1:30, au plus tard 8 heures après la mort ou l’abattage |
La sérologie des règles autorise la réalisation d'une analyse ELISA et/ou d'un analyseur RED, tandis que les études moléculaires sont effectuées par la méthode PCR (p). 20). L'étude sérologique planifiée des animaux de plus de 6 mois est effectuée une fois par an, et les animaux (à l'exception des taureaux utilisés dans les cas d'urgence) font l'objet d'une étude deux fois par an, à un intervalle d'au moins 180 jours (p. 9). Les animaux sont examinés de la même manière pendant 180 jours avant d'entrer dans l'exploitation (p. 8).
Les veaux reçoivent les anticorps maternels par le colostrum. Selon le manuel de l’OMSA, ces anticorps peuvent persister jusqu’à l’âge de 6–7 mois. Les anticorps acquis passivement ne peuvent pas être distingués de ceux produits après une infection. Un veau séropositif peut ne pas être infecté, tandis que le taux d’anticorps d’un veau infecté peut diminuer temporairement.
Une étude argentine illustre ce phénomène. Sept veaux infectés au cours de leur première semaine de vie ont été suivis. Chez six d’entre eux, les titres d’anticorps ont diminué à 3–6 mois, puis augmenté de nouveau. À 12 mois, la charge provirale était élevée chez les sept veaux. Certains sont infectés in utero : selon les études de terrain résumées dans une revue de 2018, cela concernait 4–18 % des nouveau-nés examinés avant la prise de colostrum.
La PCR détecte l’ADN proviral, donc l’infection elle-même. Cela correspond au paragraphe 18 : du sang avec anticoagulant est prélevé chez les veaux âgés de 15 jours à 6 mois pour la PCR. L’OMSA considère également la PCR utile en cas d’ELISA faiblement positif ou douteux et après une infection récente, avant l’apparition des anticorps. Les anticorps deviennent détectables chez les bovins 3–16 semaines après l’infection.
L'âge de 6 mois est également important pour les veaux nés de vaches infectées dans la réserve. On ne peut les faire sortir qu'après 6 mois et trois résultats négatifs de la sérologie. L'intervalle entre les recherches va de 90 à 120 jours civils (p. 42).
Un résultat PCR négatif a également des limites. Seule une faible proportion des cellules mononucléées du sang est infectée, et des inhibiteurs présents dans l’échantillon peuvent produire un faux négatif. Un contrôle positif est donc nécessaire à chaque série d’analyses.
Le paragraphe 18 fixe les délais suivants pour les prélèvements sérologiques et hématologiques :
Le manuel de l’OMSA décrit une limitation similaire pour l’immunodiffusion en gélose. Avant le vêlage, les anticorps passent du sang de la vache dans le colostrum. Un résultat négatif sur sérum pendant les 2–6 semaines précédant le vêlage ou les 1–2 premières semaines suivantes n’est donc pas définitif, et l’analyse est répétée. Durant cette période, le colostrum de la première traite peut être utilisé pour l’immunodiffusion en gélose.
L'inventaire des échantillons est joint à la lettre d'accompagnement (p. 19). Elle indique le numéro de l'échantillon, le numéro de l'étiquetage animal, le sexe et l'âge. Ils indiquent également la date de la dernière introduction d'un vaccin vivant ou d'une allergène et la date de l'étage ou de l'obturateur.
Selon le paragraphe 19, les échantillons sont placés dans des récipients étanches, refroidis et transportés dans un contenant isotherme avec de la glace ou un autre réfrigérant. Les récipients sont emballés et scellés. La lettre d’envoi indique la date et l’heure du prélèvement, la date de la dernière vaccination, l’exploitation, le motif de l’analyse et les coordonnées du professionnel ayant effectué le prélèvement.
Le manuel de l’OMSA ajoute des précisions pratiques :
Les deux méthodes recherchent des anticorps. Selon le manuel de l’OMSA, la plupart des tests détectent les anticorps contre la glycoprotéine d’enveloppe gp51, qui apparaissent avant les autres. Le sérum de référence E05 de l’OMSA sert à évaluer la sensibilité de l’ELISA et à standardiser l’antigène utilisé en immunodiffusion en gélose.
| Immunodiffusion en gélose (AGID) | ELISA | |
|---|---|---|
| Type d’échantillon | Sérum individuel; Avec du lait, il n'y a que la première molosse. | Sérum; Certains laitiers sont utilisés; Certains ELISA sont suffisamment sensibles aux échantillons prélevés |
| Caractéristiques selon l’OMSA | Spécifique, mais peu sensible ; simple à réaliser | Généralement plus sensible que l’immunodiffusion en gélose |
| Lecture des résultats | Après 24, 48 et 72 heures | Par mesure de la densité optique avec un lecteur de microplaques |
Comment interpréter l’immunodiffusion en gélose. Un échantillon est positif s’il forme avec l’antigène une ligne de précipitation qui fusionne avec celle du sérum de référence. Un échantillon faiblement positif incurve la ligne de contrôle vers le puits d’antigène sans former sa propre ligne. Les sérums douteux ou faiblement positifs peuvent être concentrés puis réanalysés. Si les contrôles donnent des résultats inattendus, la série n’est pas validée.
Comment interpréter l’ELISA. Pour l’ELISA de blocage, le manuel de l’OMSA décrit une zone intermédiaire. Un animal dont le résultat se situe dans cette zone est réexaminé sur un échantillon prélevé un mois plus tard. Pour certains kits, l’OMSA déconseille de déterminer le statut d’un animal sur un seul ELISA positif et recommande une confirmation par une seconde méthode.
Les règles distinguent deux statuts. Un animal infecté est séropositif, mais son analyse hématologique est négative et il ne présente pas de lésions anatomopathologiques. Un animal malade présente une hématologie positive ou des lésions caractéristiques (paragraphe 22). Les mesures dans le foyer dépendent de ce statut : les animaux malades sont envoyés à l’abattoir dans les 15 jours calendaires suivant l’hématologie positive (paragraphe 33).
L’hématologie est considérée comme positive lorsque les seuils correspondant à l’âge sont dépassés dans 1 µl de sang (paragraphe 22) :
| Âge | Leucocytes, au-delà de | Lymphocytes, nombre absolu | Proportion de lymphocytes, au-delà de |
|---|---|---|---|
| De 6 mois à 2 ans | 12 000 | 11 000 | 75% |
| De 2 à 4 ans | 11 000 | 10 000 | 70% |
| De 4 à 6 ans | 10 000 | 9 000 | 65% |
| Plus de 6 ans | 9 000 | 8 000 | 60% |
Le diagnostic de leucose est considéré comme établi en présence d’une hématologie positive ou de lésions histologiques caractéristiques (paragraphe 21). Dans les établissements de détention séparée, les animaux infectés sont soumis à une analyse hématologique tous les 6 mois (paragraphe 41).
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Les règles prévoient la PCR chez les veaux à partir de 15 jours calendaires. Aucune méthode n’y est indiquée pour les veaux plus jeunes.
Selon le manuel de l’OMSA, aucune preuve concluante de transmission à l’être humain n’a été établie, et le virus n’est généralement pas considéré comme dangereux pour l’être humain. L’EFSA ne trouve pas non plus de fondement scientifique pour classer la leucose bovine parmi les zoonoses.
En l’absence également de lésions anatomopathologiques, la vache est considérée comme infectée, mais non malade (paragraphe 22). Dans un foyer épizootique, cet animal est isolé dans les 15 jours calendaires suivant la détection des anticorps, puis envoyé à l’abattoir ou transféré dans un établissement de détention séparée (paragraphe 33). Dans cet établissement, son sang est soumis à une analyse hématologique tous les 6 mois (paragraphe 41).
Non. Le prélèvement sanguin pour la sérologie doit avoir lieu au plus tôt 14 jours calendaires après le vêlage (paragraphe 18). Selon le manuel de l’OMSA, les anticorps sériques peuvent ne pas être détectables par immunodiffusion en gélose pendant les 1–2 premières semaines après le vêlage.
Les règles autorisent les deux méthodes. Selon le manuel de l’OMSA, l’ELISA est généralement plus sensible, tandis que l’immunodiffusion en gélose est plus simple à réaliser. L’OMSA indique également que certains ELISA sont suffisamment sensibles pour analyser des mélanges d’échantillons.
Ce document est fourni à titre informatif et ne remplace ni les règles vétérinaires ni l’avis d’un professionnel vétérinaire. Le diagnostic est établi à partir des résultats des analyses de laboratoire, selon la procédure prévue par la législation.
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