Лейкоз вызывает вирус лейкоза крупного рогатого скота (bovine leukaemia virus, BLV). Это онкогенный РНК-содержащий вирус рода Deltaretrovirus семейства Retroviridae. Его геном в виде провирусной ДНК встраивается в ДНК заражённых клеток, прежде всего B-лимфоцитов. Заражение пожизненное, антитела к вирусу сохраняются постоянно. Вакцин против лейкоза нет, лечения тоже.
Правила выделяют три стадии болезни: бессимптомную, гематологическую и клиническую. На первых двух характерных признаков нет. В бессимптомной стадии в сыворотке есть антитела к вирусу, в гематологической в крови стойко повышено число лимфоцитов. Инкубационный период, по правилам, длится от 2 месяцев до 6 лет.
По руководству Всемирной организации здравоохранения животных (ВОЗЖ, WOAH), большинство заражений протекает субклинически. Стойкий лимфоцитоз развивается у 30–70% заражённых животных, опухоли появляются у 0,1–10%, обычно в возрасте старше 3 лет. Поэтому заражённых животных в стаде выявляют лабораторными методами.
Опухоли у крупного рогатого скота вызывает не только BLV. Руководство ВОЗЖ отдельно выделяет спорадический лейкоз. Так называют лимфомы у телят, а также кожную и тимусную формы; их причина неизвестна. Термин «энзоотический лейкоз» ВОЗЖ оставляет только для лимфом, вызванных BLV. Отличить одно от другого по опухоли помогает ПЦР: ВОЗЖ называет её полезной при исследовании опухолей, в том числе взятых на бойне.
Порядок исследований задают Ветеринарные правила по лейкозу КРС, утверждённые приказом Минсельхоза России от 24.03.2021 № 156. Они действуют до 1 сентября 2027 года. С 1 сентября 2025 года правила применяются в редакции приказа Минсельхоза России от 08.04.2025 № 229.
Методы исследования (п. 20) и сроки отбора крови относительно вакцинации и отёла (п. 18) остались прежними. Изменились интервалы исследований, требования к завозу и порядок постановки диагноза по серологии. Главное для лаборатории:
Пункт 18 правил связывает возраст и статус животного с методом, материалом и пробиркой:
| Группа | Метод | Проба по п. 18 |
|---|---|---|
| Телята от 15 дней до 6 месяцев включительно | ПЦР | кровь 5–7 мл с антикоагулянтом: 3%-ный раствор ЭДТА в соотношении 10:1 или цитрат натрия |
| Животные старше 6 месяцев | РИД и (или) ИФА | кровь 5–7 мл без антикоагулянта или с фактором свёртывания крови |
| Животные старше 6 месяцев с положительной серологией | гематология | кровь 5–7 мл с 10%-ным раствором ЭДТА, 0,02 мл на 1 мл крови |
| Павшие животные | гистология (п. 21) | кусочки органов 2×2×1 см в 10%-ном формалине 1:30, не позже 8 часов после гибели или убоя |
Серологию правила разрешают проводить методом ИФА и (или) РИД, а молекулярные исследования проводят методом ПЦР (п. 20). Плановое серологическое исследование скота старше 6 месяцев проводят раз в год, а животных-продуцентов (кроме быков, которых используют в случке) исследуют дважды в год с интервалом не меньше 180 дней (п. 9). Животных для комплектования стада исследуют теми же методами в течение 180 дней до поступления в хозяйство (п. 8).
С молозивом телёнок получает материнские антитела. По руководству ВОЗЖ, они могут исчезать до 6–7 месяцев. Пассивно полученные антитела невозможно отличить от антител, которые образовались при заражении. Серопозитивный телёнок может быть не заражён, а у заражённого телёнка антитела на время могут снизиться.
Показателен пример из аргентинского исследования. Там наблюдали семь телят, заражённых в первую неделю жизни. У шести из них титры антител к 3–6 месяцам падали, а потом снова росли. Провирусная нагрузка к 12 месяцам была высокой у всех семи. Часть телят заражается ещё в матке: в полевых исследованиях, по обзору 2018 года, таких было 4–18% новорождённых, проверенных до выпойки молозива.
ПЦР выявляет провирусную ДНК, то есть само заражение. Этому соответствует норма п. 18: от телят от 15 дней до 6 месяцев берут кровь с антикоагулянтом для ПЦР. ВОЗЖ называет ПЦР полезной и в других случаях: при слабоположительном или сомнительном ИФА и при недавнем заражении, когда антитела ещё не появились. Антитела у скота выявляются через 3–16 недель после заражения.
Возраст 6 месяцев важен и для телят, родившихся от инфицированных коров в резервации. Вывезти их оттуда можно только после 6 месяцев и трёх отрицательных результатов серологии. Интервал между исследованиями составляет от 90 до 120 календарных дней (п. 42).
Отрицательная ПЦР тоже имеет пределы. Заражена лишь малая доля мононуклеаров крови, а ингибиторы в пробе могут дать ложноотрицательный результат. Поэтому в каждой постановке нужен положительный контроль.
Пункт 18 задаёт сроки для серологических и гематологических проб:
Похожее ограничение для РИД описывает руководство ВОЗЖ. Перед отёлом антитела переходят из крови коровы в молозиво. Поэтому отрицательная РИД сыворотки за 2–6 недель до отёла и в первые 1–2 недели после него не окончательна, исследование повторяют. РИД в этот период можно поставить с молозивом первого удоя.
Чтобы соблюдение сроков можно было проверить, к сопроводительному письму прикладывают опись проб (п. 19). В ней указывают номер пробы, номер средства маркирования животного, пол и возраст. Там же указывают дату последнего введения живой вакцины или аллергена и дату отёла или планового отёла.
По п. 19 правил пробы кладут в герметичные контейнеры, охлаждают и перевозят в термосе со льдом или другим хладагентом. Ёмкости упаковывают и опечатывают. В сопроводительном письме указывают дату и время отбора, дату последней вакцинации, хозяйство, основание исследования и контакты специалиста, отобравшего пробы.
Руководство ВОЗЖ добавляет практические детали:
Оба метода ищут антитела. Большинство тестов, по руководству ВОЗЖ, выявляют антитела к гликопротеину оболочки gp51: они появляются раньше других. По эталонной сыворотке ВОЗЖ E05 оценивают чувствительность ИФА и стандартизуют антиген для РИД.
| РИД (AGID) | ИФА | |
|---|---|---|
| Материал | индивидуальная сыворотка; из молока подходит только первое молозиво | сыворотка; отдельные наборы работают с молоком; некоторые ИФА достаточно чувствительны для сборных проб |
| Свойства по ВОЗЖ | специфичен, но не очень чувствителен; прост в постановке | обычно чувствительнее РИД |
| Учёт | через 24, 48 и 72 часа | по оптической плотности на планшетном фотометре |
Как читать РИД. Проба положительна, если даёт с антигеном линию преципитации, которая сливается с линией контрольной сыворотки. Слабоположительная проба загибает контрольную линию к лунке с антигеном, но своей линии не образует. Сомнительные и слабоположительные сыворотки можно сконцентрировать и исследовать снова. Если контроли дали неожиданный результат, постановку не учитывают.
Как читать ИФА. Для блокирующего ИФА руководство ВОЗЖ описывает промежуточную зону. Животное с результатом в этой зоне исследуют повторно по пробе, взятой через месяц. Для некоторых наборов ВОЗЖ не советует определять статус животного по одному положительному ИФА и рекомендует подтвердить результат вторым методом.
Правила различают два статуса. Инфицированное животное серопозитивно, но гематология у него отрицательна и патологоанатомических изменений нет. Больное животное дало положительную гематологию или у него нашли характерные изменения (п. 22). От статуса зависят меры в очаге: больных животных направляют на убой в течение 15 календарных дней после положительной гематологии (п. 33).
Гематологию считают положительной, если в 1 мкл крови превышены пороги по возрасту (п. 22):
| Возраст | Лейкоциты, более | Лимфоциты, абсолютное число | Доля лимфоцитов, свыше |
|---|---|---|---|
| от 6 месяцев до 2 лет | 12 000 | 11 000 | 75% |
| от 2 до 4 лет | 11 000 | 10 000 | 70% |
| от 4 до 6 лет | 10 000 | 9 000 | 65% |
| старше 6 лет | 9 000 | 8 000 | 60% |
Диагноз лейкоза считается установленным при положительной гематологии или при характерных изменениях, найденных гистологически (п. 21). В резервации инфицированных животных исследуют гематологически каждые 6 месяцев (п. 41).
Подобрать наборы под задачи и оборудование лаборатории помогут специалисты ВЕТ ФАКТОР: +7 (495) 789-48-11, vet@faktor.ru.
Правила назначают ПЦР телятам с возраста 15 календарных дней. Для более раннего возраста метод в правилах не назван.
По руководству ВОЗЖ, убедительных данных о передаче вируса человеку нет, и его обычно не считают опасным для людей. EFSA тоже не находит научных оснований относить лейкоз КРС к зоонозам.
Если патологоанатомических изменений тоже нет, корова считается инфицированной, но не больной (п. 22). В эпизоотическом очаге такое животное в течение 15 календарных дней со дня обнаружения антител изолируют и направляют на убой либо вывозят в резервацию (п. 33). В резервации его кровь исследуют гематологически каждые 6 месяцев (п. 41).
Нет. Кровь для серологии берут не раньше чем через 14 календарных дней после отёла (п. 18). По руководству ВОЗЖ, в первые 1–2 недели после отёла антитела в сыворотке могут не выявляться в РИД.
Правила допускают оба метода. По руководству ВОЗЖ, ИФА обычно чувствительнее, а РИД проще в постановке. По ВОЗЖ, некоторые ИФА достаточно чувствительны и для сборных проб.
Материал носит справочный характер и не заменяет ветеринарные правила и заключение ветеринарного специалиста. Диагноз устанавливают по результатам лабораторных исследований в порядке, установленном законодательством.
© 2015 – 2026 ООО «ВЕТ ФАКТОР» Все права защищены.
